La proteína PPR-SMR de musgo PpPPR_64 influye en la expresión de un grupo de genes psaA-psaB-rps14 y en el procesamiento del precursor 23S-4.5S rRNA en cloroplastos
La proteína PPR-SMR de musgo PpPPR_64 es un homólogo de pTAC2 pero es funcionalmente distinta de pTAC2. PpPPR_64 es necesaria para la expresión del gen psaA y su función puede haber evolucionado en los musgos. Las proteínas de repetición pentatricopeptídica (PPR) son factores reguladores clave responsables del control de la expresión génica organelar de las plantas. Un pequeño subconjunto de proteínas PPR posee un pequeño dominio C-terminal relacionado con MutS (SMR) y tiene diversas funciones en la biogénesis organelar de las plantas. Sin embargo, no se conoce del todo la función de las proteínas PPR-SMR.
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Aquí, informamos de la función de la proteína PPR-SMR PpPPR_64 en el musgo Physcomitrium patens. El análisis filogenético indicó que PpPPR_64 pertenece al mismo clado que la proteína PPR-SMR pTAC2 de Arabidopsis. Los mutantes knockout (KO) de PpPPR_64 crecieron autótrofamente pero con un crecimiento reducido de protonemas y una deficiente formación de complejos antena de fotosistemas.
Los análisis cuantitativos de reacción en cadena de la polimerasa con transcripción inversa y de hibridación en gel de ARN revelaron una reducción significativa en los niveles de transcripción del grupo de genes psaA-psaB-rps14, pero ninguna alteración en los niveles de transcripción de la mayoría de los genes relacionados y no relacionados con la fotosíntesis.
Además, el procesamiento del ARN precursor del ARNr 23S-4.5S se vio afectado en los mutantes PpPPR_64 KO. Esto sugiere que PpPPR_64 está específicamente implicado en el nivel de expresión del gen psaA-psaB-rps14 y en el procesamiento del precursor 23S-4.5S rRNA. Nuestros resultados indican que PpPPR_64 es funcionalmente distinta de pTAC2 y es una nueva proteína PPR-SMR necesaria para la correcta biogénesis del cloroplasto en P. patens.
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Las composiciones de la membrana externa mejoran la tasa de transporte extracelular de electrones a través de la proteína MtrC de la superficie celular en Shewanella oneidensis MR-1
Aunque la composición de la membrana celular es crítica para la función de las proteínas de membrana, la modificación de la membrana no se ha utilizado para controlar la tasa de transferencia extracelular de electrones (EET) a través de los complejos de proteínas de membrana externa. En este trabajo, la tasa de flujo de electrones a través de la proteína redox de la superficie celular, MtrC, se vio altamente aumentada tras el cambio en la composición de la membrana externa en Shewanella oneidensis MR-1. La cepa MR-1 fue precultivada y se modificó para que funcionara como un complejo de proteínas de membrana externa.
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La cepa MR-1 se cultivó previamente a 4 °C y 30 °C para iniciar la diferenciación de la composición de la membrana. El ensayo electroquímico diferencial de células enteras de cepas de tipo salvaje y mutantes carentes de MtrC sugirió que la tasa de EET a través de MtrC aumentaba aproximadamente 18 veces a 4 °C que a 30 °C.
La espectroscopia de dicroísmo circular mostró que el coeficiente de acoplamiento molar de excitones para la interacción inter-heme en MtrC aumentaba en MR-1 a 4 °C que a 30 °C. Los resultados sugieren que la modificación de la membrana puede ser una estrategia novedosa para mejorar la eficiencia de las tecnologías basadas en EET.
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Glicoproteína alfa-2 rica en leucina (LRG): Una nueva proteína de fase aguda expresada en la periodontitis de grado C en estadio 3 antes y después de la terapia periodontal
Antecedentes: La glucoproteína alfa-2 rica en leucina (LRG) es una nueva proteína de fase aguda implicada en enfermedades asociadas a la inflamación y que se considera inducida por múltiples citoquinas proinflamatorias.
El objetivo de este estudio era investigar los niveles séricos y de líquido crevicular gingival (LCR) de LRG, interleucina (IL)-6 y factor de necrosis tumoral (TNF)-α en pacientes con periodontitis en estadio 3 antes y después de un tratamiento periodontal no quirúrgico.
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Métodos: Veinticinco periodontitis estadio 3 y veinticinco individuos periodontalmente sanos se inscribieron en el estudio. Se registraron las mediciones periodontales clínicas; los pacientes con periodontitis recibieron tratamiento periodontal no quirúrgico, y se obtuvieron muestras de GCF y de suero al inicio y a las 6 semanas después del tratamiento. Se determinaron la LRG, la IL-6 y el TNF-α mediante ELISA.
Resultados: El GCF y el suero LRG, IL-6 y TNF-α fueron significativamente mayores en el grupo de periodontitis que en los controles sanos (P < 0,001). Tras el tratamiento periodontal se detectó una disminución significativa del GCF y de la LRG, la IL-6 y el TNF-α séricos en comparación con los valores basales de los pacientes con periodontitis (P < 0,001).
Conclusiones: Nuestros hallazgos revelaron que la expresión de LRG estaba aumentada en la periodontitis en estadio 3 tanto a nivel local como sistémico, y la terapia periodontal no quirúrgica fue eficaz en la reducción de los niveles de LRG en GCF y suero de estos pacientes. Este artículo está protegido por copyright. Todos los derechos reservados.
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| 4-Amino Biphenyl DNA (4-AMBP DNA, 4-Aminobiphenyl DNA) | |
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| 4-Amino Biphenyl DNA (4-AMBP DNA, 4-Aminobiphenyl DNA) | |
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| T4 DNA Ligase (T4 DNA) Enzyme | |
| abx073011-25g | Abbexa |
Precipitación acuosa de proteínas asistida por dos fases: Una plataforma para el aislamiento de impurezas relacionadas con el proceso a partir de proteínas terapéuticas
Los sistemas acuosos de dos fases (ATPS) se han utilizado ampliamente y con éxito en la purificación de diversas macromoléculas biológicas como proteínas, ácidos nucleicos, antibióticos y componentes celulares.
| Protein-Export Protein SecB (SecB) Protein | |||
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La precipitación interfacial del producto suele dar lugar a una menor recuperación y selectividad de los ATPS. La resolubilización eficiente del precipitado interfacial ofrece una vía para mejorar la recuperación así como la selectividad de los sistemas ATPS.
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| E01A11128 | BlueGene |
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| Paraffin Wax | |||
| Toronto Research Chemicals | |||
| Paraffin wax pellets | |||
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| Paraffin wax pellets | |||
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En este protocolo, describimos un método para la precipitación acuosa asistida por dos fases y la resolubilización del factor estimulante de colonias de granulocitos humano recombinante (GCSF) para su aislamiento selectivo de las proteínas de la célula huésped de E. coli, así como de los ácidos nucleicos.
Esta plataforma de purificación puede aplicarse a otras citocinas, así como a la mayoría de las proteínas hidrófobas que se dividen en la fase superior hidrófoba rica en PEG. Se observaron recuperaciones de hasta el 100% del producto junto con una reducción de los niveles de proteínas de células huésped de E. coli (de 250-500 a 10-15 ppm) y de ácidos nucleicos (de 15-20 a 5-15 ng/mL).
| MULTIPLEX KIT PCR MASTITIS PCR kit | |||
| Bioingentech | |||
| MULTIPLEX KIT PCR MASTITIS PCR kit | |||
| Bioingentech | |||
| PCR Mix | |||
| Biochain | |||
| PCR-EZ D-PCR MASTER MIX | |||
| Bio Basic | |||
| MULTIPLEX KIT PCR Babesia & Theileria PCR kit | |||
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Etiquetas de afinidad en la purificación de proteínas y el enriquecimiento peptídico: Una visión general
La interacción reversible entre un ligando de afinidad y un receptor complementario ha sido ampliamente explorada en los sistemas de purificación de varias biomoléculas. Una de las opciones en los sistemas de purificación por afinidad es el desarrollo de ligandos de afinidad a medida altamente específicos para determinadas biomoléculas diana.
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| E01A11128 | BlueGene |
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| E01A46041 | BlueGene |
| Mouse Cholesterol ELISA ELISA | |
| E01A19869 | BlueGene |
| Human Cholesterol ELISA ELISA | |
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Sin embargo, las modificaciones genéticas y químicas de proteínas y péptidos amplían la aplicación de pares ligando-etiqueta receptores de afinidad hacia estrategias universales de captura y purificación.
En particular, este capítulo se centrará en dos estudios de caso de gran relevancia para las áreas de biotecnología y biomedicina, a saber, las etiquetas y receptores de afinidad empleados en la producción de proteínas de fusión recombinantes, y la modificación química de grupos fosfato en proteínas y péptidos y la posterior captura y enriquecimiento específicos, un paso obligatorio antes del análisis proteómico posterior.
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Cromatografía de afinidad con ligando sintético Purificación de albúmina sérica humana y proteínas de fusión relacionadas
Los adsorbentes de afinidad de ligandos sintéticos ofrecen un medio eficaz para la purificación de productos biofarmacéuticos. El colorante textil de isómero único C.I. Reactive Blue y los ligandos más recientes desarrollados mediante el diseño racional y el cribado de bibliotecas químicas combinatorias basadas en un andamiaje de triazina se utilizan habitualmente para la captura y purificación de estas proteínas a partir de sistemas de expresión recombinante diseñados.
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Aquí describimos métodos para la purificación de albúmina sérica humana recombinante y proteínas de fusión relacionadas utilizando adsorbentes de afinidad de ligandos sintéticos.
La homeostasis redox y la activación del ciclo celular median en la expansión de la masa de células beta en ratones envejecidos y propensos a la diabetes en condiciones de estrés metabólico: Papel de la proteína que interactúa con la tiorredoxina (TXNIP)
La sobrealimentación contribuye a la resistencia a la insulina, la obesidad y el estrés metabólico, iniciando una pérdida de células beta funcionales y el desarrollo de diabetes. Apenas se ha investigado si estos efectos perjudiciales se amplifican en la edad avanzada.
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| E01A11128 | BlueGene |
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| E01A19869 | BlueGene |
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Por lo tanto, los ratones obesos de Nueva Zelanda (NZO), un modelo bien establecido para la investigación de la diabetes tipo 2 asociada a la obesidad humana, fueron alimentados con una dieta metabólicamente desafiante con un período de restricción de carbohidratos y alto contenido de grasa, seguido de una intervención de carbohidratos tanto en la edad joven como en la avanzada.
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Curiosamente, mientras que los ratones NZO jóvenes desarrollaron una hiperglucemia masiva en respuesta a la alimentación con carbohidratos, lo que condujo a la disfunción de las células beta y a la muerte celular, sus homólogos de edad avanzada compensaron el aumento de la demanda de insulina mediante la persistencia de la función de las células beta y la expansión de la masa de células beta.
La pérdida de células beta en los islotes de NZO jóvenes estaba vinculada a un aumento de la expresión de la proteína que interactúa con la tiorredoxina (TXNIP), que presumiblemente inicia una cascada de señalización de apoptosis a través de la activación de la caspasa-3. Por el contrario, los islotes de NZO envejecidos mostraban un equilibrio redox sostenido sin cambios en la expresión de TXNIP, asociado a un mayor potencial proliferativo por activación del ciclo celular.
Estos hallazgos apoyan la relevancia del mantenimiento del potencial proliferativo y la homeostasis redox para preservar la funcionalidad de los islotes bajo estrés metabólico, con la peculiaridad de que esta respuesta adaptativa surgió con la edad avanzada en ratones NZO propensos a la diabetes.
Fuentes :
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